PCR是分子生物学研究和实验的常规方法，并没有严格的净化要求，但是为了避免各个试验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排式气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。

一、PCR实验室主要的设计依据：

《实验室生物安全通用要求》 GB19489-2008

《生物安全实验室建筑技术规范》 GB50346-2011

《疾病预防控制中心技术标准》 建标127-2009

《疾病预防控制中心建筑技术规范》 GB50881-2013

《病原微生物实验室生物安全通用准则》  WS233-2017

《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》 卫生办医政发【2010】194号

二、PCR实验室分区

依据《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》，PCR实验室分为四个区：试剂准备区、样本制备区、核酸扩增区、产物分期区；

使用RT-PCR仪可以分为三个区：试剂准备区、样本制备区、扩增分析区。根据需要还可以增加区域，增加样品预处理区（坚硬的物品，牛肉干等需要磨碎），和加样室。各房间入口必须设置缓冲间。

三、PCR实验室建设的核心和控制目标

1、控制病原污染，保护生物安全，防止病原污染工作人员和环境；

2、控制核酸交叉污染，保证实验质量，防止核酸污染试剂、样本，影响检测结果。

四、PCR实验室气流组织形式：定向气流

本制备间是BSL-2/BSL-3生物安全实验室，具有生物安全风险，一定要在样本制备区内建立起使气流由低风险区流向高风险区的定向气流，避免产生给生物安全柜气流带来干扰的横向气流，否则会导致病原微生物外溢。严禁按照洁净室的做法，使用中间送风，死角回风的气流形式。

五、PCR实验室各房间的压力梯度设置

医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》规定：为了防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。可按照从试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区方向空气压力递减的方式进行。5Pa的压力梯度不容易被及控制，压力梯度宜设置为10Pa。

1、试剂准备间：是重点保护对象，要求房间清洁，不得被核酸污染，压力可设置为+15Pa；

2、样本制备间：是BSL-2/BSL-3，既要防止病原微生物外泄，防止病原污染工作人员和环境，又要保证区内样本不被核    酸污染。他本身又是个P2或P2+实验室。根据GB19489-2008<实验室生物安全通用要求>普通P2实验室可开窗换气也可加排风扇换气，开窗换气就是常压，排风扇排风就是负压，但这并不是我们说的恒定负压，只是普通排风装置。如果把样本制备间做成P2+生物安全实验室，那就要做成恒定负压。压力可设置为-15Pa；本次新冠推荐P2+的生物安全实验室中做。（埃博拉病毒样本要在P3里提取核酸对人体并无危害。）

3、核酸扩增间：需防止核酸外溢，污染其他区域，压力应低于样本制备间压力，可设置为-25Pa；

4、产物分析间：需防止核酸外溢，污染其他区域，压力应低于核酸扩增间压力，可设置为-35Pa。

六、PCR实验室各房间的温湿度及换气次数设置

七、PCR实验室通排风系统如何设置

采用集中送风，单独排风的方式 。送风：PCR实验室可采用一套空调系统对所有工作区域进行集中送风。各送风支管需要安装电动密闭阀，阀门在系统停机时自动关闭，防止各房间通过风管产生交叉污染。虽然送风管道是干净的，但还是需要通过电动密闭阀规避交叉污染。

排风：试剂准备间可单独排风，样本制备间应单独设置排风，排风经高效过滤器处理后高空排放，排风高效过滤器与排风总管的连接必须使用实体风管。核酸扩增间、产物分期间可单独排风，也可两间共同排风。

样本制备间是生物安全实验室，排风管道有可能有病原污染，必须单独排风。从防止交叉污染的角度来说，排风管道是污染管道，如果合并排风的话，核酸扩增和产物分析室的核酸有可能通过排风管道进入试剂准备室和样本制备室，造成交叉污染，影响实验结果。